Witaj! Anonymous

Mikrorozmnażanie

Mikrorozmnażanie

Postprzez tom_mix » 14 cze 2012, o 22:14

Kilka osób z forum wie już całkiem sporo na temat mikrorozmnażania storczyków z nasion czy pędów, inne osoby mniej. Z całą pewnością znajdą się też Ci, którzy nic nie wiedzą na ten temat.
Na razie mogę pogratulować Kasi/Katarzynka575 za podjęcie próby uratowania keiki na sterylnej pożywce własnej roboty, Gosi/Goskle za doprowadzenie kilku pędów do postaci małej roślinki z których jedna ma już korzonek i Michałowi z podjęcie próby :klaszcze:
Mam nadzieję że więcej osób spróbuje i im również się uda ;)

Zaczynając od kawałka suchej teorii: w dzisiejszych czasach rośliny na skalę przemysłową rozmnaża się metoda kultur tkankowych - in vitro. Dzięki niej możemy w bardzo krótkim czasie osiągnąć ogromną ilość nowych roślin. Kulturę da się zapoczątkować od pojedynczej komórki, tkanki lub określonego fragmentu organów roślinnych. Całość utrzymuje się w sterylnych warunkach na sztucznie sporządzonych pożywkach płynnych, półpłynnych lub stałych.
Wiele osób pewnie pomyśli że do tego potrzeba całego specjalistycznego laboratorium. Całe szczęście da się wszytko zrobić w domowych warunkach. Komorę z laminarnym przepływem powietrza gdzie wykonujemy wszystkie sterylne prace da się zastąpić "celanboxem" czyli np. odwróconym akwarium, kartonem wyłożonym folią lub innym pojemnikiem, wszystko zależy od naszej inwencji twórczej. Pożywkę można również samemu zrobić w łatwy sposób. Pierwszą możliwością jest przygotowanie pożywki "na zimno" ,a następnie sterylizacja w autoklawie ( w domu można go zastąpić szybkowarem), druga metodą jest zastosowania inhibitora enzymów oddechowych (PPM).

Przejdźmy do konkretów. . .

Rozmnażanie z pędów kwiatowych

1. Wybieramy storczyka z żywym pędem kwiatowym, którego chcemy rozmnożyć.

Obrazek

2. Odcinamy pęd.

Obrazek

3. Tniemy pęd na kawałki tak aby zawierał oczka i miał ok. 2-4 cm. Najłatwiej jest to zrobić nacinając lekko pęd dookoła i wyłamując. Następnie bardzo ostrożnie ściągamy skórkę z oczka, tak aby nie uszkodzić tego co się znajduje pod spodem.

Obrazek


4. Myjemy kawałki pędów pod bieżącą wodą z dodatkiem detergentu lub płuczemy w pojemniku zawierającym wodę z dodatkiem płynu do mycia naczyń ( 2-5 min)

5. Przygotowujemy 100ml roztworu domestosu w proporcjach: 1cz domestosu na 9 cz wody. Dodajemy ok. 1 ml octu spożywczego ( można użyć innego środka zawierającego podchloryn sodu)


Obrazek

6. Zanurzamy kawałki pędów na chwilkę w alkoholu. Można użyć denaturatu.
7. Kawałki pędów umieszczamy w roztworze środka sterylizującego na ok. 8 min. Co jakiś czas wstrząsamy. Można to zrobić poza cleanboxem. Nie używamy do tego celu sterylnych narzędzi, gdyż będzie je trzeba jeszcze raz wysterylizować.

Obrazek

8. W międzyczasie do naszego cleanboxa wkładamy r-r do sterylizacji z pędami, sterylne narzędzia, pożywki, sterylną wodę do płukania. Całość spryskujemy 70% alkoholem etylowym lub izopropylowym.


9.Spryskujemy dłonie alkoholem (70%), osoby o wrażliwej skórze powinni ubrać latexowe rękawiczki. Upewniamy się że cleanbox został również spryskany, odkażony i przystępujemy do płukania kawałków pędów z resztek wybielacza. Za pomocą sterylnej pęsety wyjmujemy pędy i wkładamy do pojemnika ze sterylną wodą. Czekamy ok. 5 min, wstrząsając pojemnikiem od czasu do czasu. Czynność tą powtarzamy 3 razy (potrzebne są 3 słoiki)


10. Po zakończeniu płukania uchylamy wieczka pojemników i pędy wykładamy na pożywkę. Może być poziomo jak i pionowo. Wkładając pionowo należy ułożyć pęd zgodnie z kierunkiem wzrostu. Staramy się nie przenosić rąk nad pożywką i nie wykonujemy gwałtownych ruchów.

Obrazek

11. Zamakamy pojemnik, odkładamy.
12. Naszą kulturę podpisujemy i odkładamy w jasne, lecz nie nasłonecznione miejsce o temp. pokojowej.

Wszytko robiła siostra, więc to nie ja mam takie ładne paznokcie ;-)

Uwaga!
-po spryskaniu alkoholem należy zachować szczególną ostrożność i nie używać w pobliżu źródeł ognia
-wszystkie czynności najlepiej wykonywać w pokoju gdzie nie kręcą się trzecie osoby np. kuchnia w której łatwiej utrzyma sterylność
-na niektórych zdjęciach widoczna jest folia, zabezpiecza ona przed nadmierną wymianą „brudnego” powietrza

Wysiewanie nasion

Wysiewanie nasion wykonujemy podobnie jak szczepienie pędów na pożywki. Najpierw przygotowujemy „plac boju”. Wkładamy do cleanboxa sterylne strzykawki, igły, pojemniki z pożywkami, tniemy paski bibuły na malutkie kwadraciki tak żeby można je włożyć pomiędzy strzykawkę a igłę.


Następnie sporządzamy roztwór do sterylizacji tym razem słabszy składający się z 5ml środka sterylizującego i 95ml wody ( możemy również skorzystać z np. wody utlenionej) Zanurzamy kawałki bibuły

Do sterylnej strzykawki wsypujemy nasiona, nabieramy środka sterylizującego i czekamy ok. 5-10 min (w zależności od rodzaju nasion) wstrząsając od czasu do czasu.

Po upływie wyznaczonego czasu, zakładamy igłę wraz z bibułą która będzie zatrzymywać nam nasiona w środku ( inaczej nasiona nam wypłyną) , do strzykawki nabieramy odrobinę alkoholu tak aby piana zniknęła. Możemy przystąpić do płukania nasion. Środek sterylizujący usuwamy ze strzykawki, a następnie nabieramy sterylnej wody i płuczemy. Powtarzamy czynności ok. 5-8razy (ważne żeby nie robiła się piana przy wstrząsaniu). Jeśli jesteśmy pewni że cały środek sterylizujący został wypłukany możemy nabrać ok. 1-2ml wody do strzykawki, zdjąć igłę z bibułowym filtrem i całość nasion po prostu wstrzyknąć na pożywkę.
Teraz wystarczy czekać na efekty.


sterylne narzędzia

potrzebujemy
- pęsety
- źródła ognia
- alkoholu

Wykonanie:

Bierzemy naszą pęsetę, maczamy w alkoholu i przykładamy do źródła ognia (należy uważać aby nie zamoczyć zbyt dużo, gdyż nie będziemy mieli za co złapać) gdy alkohol się już wypali opalamy jeszcze przez chwilę. Gorący przyrząd wkładamy do cleanboxa, który wcześniej został przetarty środkiem odkażającym np. alkoholem.
Takim oto sposobem mamy sterylne narzędzie.

Po przetarciu lub spryskaniu cleanboxa alkoholem pod żadnym pozorem nie wolno używać w nim otwartego ognia!


- sterylna woda

Umyte słoiki, napełniamy w ¼ wodą destylowaną. Bardzo lekko zakręcamy wieczko, następnie robimy kapturek z folii aluminiowej. Po przygotowaniu odpowiedniej ilości słoików układamy je na blasze i wkładamy do piekarnika nastawiając go na temp 150 stopni.

Po nagrzaniu odmierzamy 30 min. Po tym czasie wyłączamy piekarnik, uchylamy i czekamy aż całość wychłodnie. Po wyjęciu słoików możemy sprawdzić czy wszystkie nakrętki porządnie złapały. Jeśli nie, dokręcamy je nie zdejmując kapturków.
Słoiki z wodą odstawiamy, a w razie potrzeby zużywamy.

Przy okazji sterylizacji wody możemy zrobić sobie sterylny papier, wystarczy ułożyć go na foli aluminiowej, zawinąć i ponownie zwinąć kolejną warstwą folii.


Jeśli dotarliście do końca to znak że powinniście spróbować :hyhy:
Avatar użytkownika
tom_mix
VIP
VIP
 
Posty: 2626
Dołączył(a): 18 gru 2011, o 22:25
Lokalizacja: Raszowa, Wrocław
Status: Aktywny

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez nina1611 » 15 cze 2012, o 07:49

bardzo ciekawa lekcja :padam:
pozdrawiam, Małgorzatka :)

storczyki cz. I , II , III, IV

cz. V

cz. VI

cz. VII

cz. VIII

Kopiowanie i rozpowszechnianie moich zdjęć bez mojej zgody jest zabronione.
Avatar użytkownika
nina1611
VIP
VIP
 
Posty: 8288
Dołączył(a): 15 sty 2012, o 19:48
Lokalizacja: opolskie

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez myrtille1986 » 15 cze 2012, o 08:55

Tomku gdzie Ty te eksperymenty robisz??
Pozdrawiam Jagoda

Moje wątki
Avatar użytkownika
myrtille1986
VIP
VIP
 
Posty: 2364
Dołączył(a): 15 sty 2012, o 18:03
Lokalizacja: Radom/Wrocław

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez tom_mix » 15 cze 2012, o 09:23

Jagódko, w budynku gospodarczym mam wydzielony pokoik i tam jest moje królestwo lol
Avatar użytkownika
tom_mix
VIP
VIP
 
Posty: 2626
Dołączył(a): 18 gru 2011, o 22:25
Lokalizacja: Raszowa, Wrocław
Status: Aktywny

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez myrtille1986 » 15 cze 2012, o 16:40

Tomku to co Ty tam jeszcze pędzisz ;-) :cool: hehe
Pozdrawiam Jagoda

Moje wątki
Avatar użytkownika
myrtille1986
VIP
VIP
 
Posty: 2364
Dołączył(a): 15 sty 2012, o 18:03
Lokalizacja: Radom/Wrocław

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez Karolkaaa » 15 cze 2012, o 17:21

Rewelacja, gratuluje pouczajacej lekcji.
Jagoda a co bys chciala zeby pedzil?
"Orchidee, dają tyle radości...one są moją pasją"

Pozdrawiam Karolina
Avatar użytkownika
Karolkaaa
VIP
VIP
 
Posty: 1735
Dołączył(a): 19 mar 2012, o 19:20
Lokalizacja: Łódź

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez goskle » 15 cze 2012, o 20:03

Super, że pokazałeś to wszystkim.. tutaj..
Oby innym osobom, też tak łatwo szło.. (między innymi mnie) :język:
Avatar użytkownika
goskle
Ekspert
Ekspert
 
Posty: 884
Dołączył(a): 15 sty 2012, o 21:49
Lokalizacja: Bydgoszcz

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez tom_mix » 16 cze 2012, o 09:50

Dziewczyny, nic więcej nie pędzę :język: drożdżom i innym grzybom mówię nie. Musi być jak najbardziej czystko.

Gosiu, przecież Tobie idzie jak z płatka :ok:

Na zachętę trochę zdjęć lol

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek

Obrazek
Avatar użytkownika
tom_mix
VIP
VIP
 
Posty: 2626
Dołączył(a): 18 gru 2011, o 22:25
Lokalizacja: Raszowa, Wrocław
Status: Aktywny

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez rysia13 » 16 cze 2012, o 13:19

Ja wiem ,że to ma być wątek "bardziej"merytoryczny, ale mnie te zdjęcia wprowadziły w bajkowy nastrój (a jestem w pracy :gwizdać:
Pozdrawiam Rysia
Mój wątek na poprzednim forum storczykowy kwietnik

Obecne wątki
cz.I Storczykowy kwietnik cz.II Storczykowy kwietnik II cz.III Storczykowy kwietnik III cz.IV Storczykowy kwietnik IV
Avatar użytkownika
rysia13
VIP
VIP
 
Posty: 3196
Dołączył(a): 15 sty 2012, o 18:14
Lokalizacja: Tomaszów Lubelski

Re: Mikrorozmnażanie

Postprzez Elżbieta » 29 cze 2012, o 21:07

Tomku jesteś boski.
Też bym chciała spróbować,wtedy robiłam sama przeczytawszy jakiś artykuł,ale jak się zaczynało,to się skończyło.
A to co Ty pokazałeś jest nieziemskie.Może kiedyś spróbuję.A skąd bierzesz agar?
Pozdrawiam
Elżbieta

Aby życie było życiem,musi być bajką.

Część 1 http://www.storczykarze.pl/forum/viewtopic.php?f=10&t=409
Avatar użytkownika
Elżbieta
Mistrz
Mistrz
 
Posty: 1448
Dołączył(a): 7 cze 2012, o 10:32
Lokalizacja: Pasieki/Tomaszów Lubelski

Następna strona

Powrót do Mikrorozmnażanie

Kto przegląda forum

Użytkownicy przeglądający ten dział: Brak zidentyfikowanych użytkowników i 1 gość